原位杂交杂交液
(一)杂交液内除含一定浓度的标记探针外,还含有较高浓度的盐类、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛白蛋白及载体DNA或RNA等。
(二)杂交液中含有较高浓度的Na+可使杂交率增加,可以减低探针与组织标本之间的静电结合。
(三)贾酰胺可使杂交温度降低,所以杂交液中加入适量的甲酰胺,可避免因杂交温度过高而引起的组织形态结构的破坏以及标本的脱落。
(四)硫酸葡聚糖能与水结合,从而减少杂交液的有效容积,提高探针有效浓度,以达到提高杂交率的目的。
植物染色体原位杂交是一种重要的分子生物学技术,它可以用来研究植物基因组的结构和功能。该技术利用DNA探针与目标DNA序列的互补性结合,通过荧光或性标记来检测目标DNA序列在染色体上的位置和数量。
植物染色体原位杂交技术的基本原理是将DNA探针标记上荧光或性同位素,然后将其与目标DNA序列进行杂交。在杂交过程中,探针与目标DNA序列互补结合,形成稳定的双链DNA分子。随后,通过荧光或性同位素探测技术,可以检测到目标DNA序列在染色体上的位置和数量。
植物原位杂交在遗传育种方面的应用主要包括:
异源染色质及多种染色体畸变检测:通过远缘杂交把有用遗传物质基因的异源染色质渐渗到植物中。如带有几种抗病基因的黑麦1R染色体已被整合到许多高产的小麦品种中。原位杂交技术则是鉴定外源染色体(质)的有效手段。
基因组印记研究:基因组印记是指一个基因的两条染色体上的DNA序列存在差异。通过植物原位杂交技术,可以检测到基因组印记的存在和分布,从而帮助确定基因组的进化、遗传和功能特征。